<div dir="ltr"><div dir="ltr">Dear Borries,<div>As Amy suggested before, I think the first ideia would be to use the same experimental conditions assayed by Matsui (attached paper). For SV-AUC experiments, the toxin was dissolved in 20 mM Tris-HCl pH 8.0 and 200 mM NaCl at a concentration of 1 mg/mL in the presence or absence of 1% (w/v) SDS. SDS titration seems to be a good idea too. </div><div>Regarding NMR, what kind of experiment are you planning ?</div><div>Regards,</div><div>AnaG</div></div><br><div class="gmail_quote"><div dir="ltr" class="gmail_attr">Em qua., 12 de fev. de 2020 às 18:02, Borries Demeler <<a href="mailto:demeler@gmail.com" target="_blank">demeler@gmail.com</a>> escreveu:<br></div><blockquote class="gmail_quote" style="margin:0px 0px 0px 0.8ex;border-left:1px solid rgb(204,204,204);padding-left:1ex">Dear Ana and Bruno,<br>
We are gearing up to start the AUC experiment in the presence of SDS.<br>
Bruno, could you please go into your LIMS account at:<br>
<br>
        <a href="https://uslims.uleth.ca/uslims3_CCH/login.php" rel="noreferrer" target="_blank">https://uslims.uleth.ca/uslims3_CCH/login.php</a><br>
<br>
and update your LIMS project ("Myotoxin-II at high concentration") and <br>
explain in the "Buffer Components" and "Experimental Design" section <br>
how we should prepare the buffer and protein, i.e., what SDS<br>
concentrations to use, what buffer to use, what protein concentrations<br>
to try. My suggestion would be to use a moderate concentration (say, 0.5<br>
OD 280 nm), and perhaps do a SDS titration, but want to defer to you<br>
or Ana in case you have a better idea.<br>
<br>
Amy is planning the experiments for the end of this week and it would be <br>
good to get this info soon.<br>
<br>
On another topics:<br>
Paul and TOny: We have sufficient new material on hand to run the<br>
baseline NMR experiments on Myotoxin now. Please send Amy instructions<br>
for what concentration, buffer etc. you will need and we will bring it<br>
to you. WHen can we run the NMR experiments?<br>
<br>
Thanks, -Borries<br>
_______________________________________________<br>
Myotox mailing list<br>
<a href="mailto:Myotox@biophysics.uleth.ca" target="_blank">Myotox@biophysics.uleth.ca</a><br>
<a href="http://demeler7.uleth.ca/mailman/listinfo/myotox" rel="noreferrer" target="_blank">http://demeler7.uleth.ca/mailman/listinfo/myotox</a><br>
</blockquote></div><br clear="all"><div><br></div>-- <br><div dir="ltr"><div dir="ltr"><div><div dir="ltr"><div dir="ltr"><div dir="ltr"><div><span style="color:rgb(11,83,148);font-family:tahoma,sans-serif;font-size:x-small">Ana Gisele da C. Neves Ferreira</span><br></div><div><font style="background-color:rgb(255,255,255)" face="tahoma, sans-serif" color="#0b5394" size="1">Pesquisadora Titular em Saúde Pública</font></div><div><font style="background-color:rgb(255,255,255)" face="tahoma, sans-serif" color="#0b5394" size="1">Chefe do Laboratorio de Toxinologia</font></div><div><font style="background-color:rgb(255,255,255)" face="tahoma, sans-serif" color="#0b5394" size="1">Instituto Oswaldo Cruz - Fiocruz</font></div><div><font style="background-color:rgb(255,255,255)" face="tahoma, sans-serif" color="#0b5394" size="1">Pavilhao Ozorio de Almeida, sala 05</font></div><div><font style="background-color:rgb(255,255,255)" face="tahoma, sans-serif" color="#0b5394" size="1">Av. Brasil, 4365 - Manguinhos</font></div><div><font style="background-color:rgb(255,255,255)" face="tahoma, sans-serif" color="#0b5394" size="1">Rio de Janeiro - RJ </font></div><div><font style="background-color:rgb(255,255,255)" face="tahoma, sans-serif" color="#0b5394" size="1">21040-900 Brasil</font></div><div><font style="background-color:rgb(255,255,255)" face="tahoma, sans-serif" color="#0b5394" size="1">(+5521) 2562-1381 / 98801-5726</font></div><div style="color:rgb(136,136,136);font-size:12.8px"><font size="1" color="#666666" face="tahoma, sans-serif"><br><br><br></font></div></div></div></div></div></div></div></div>